RICARDO FERNANDEZ BARRUECO

Ricardo Fernandez Barrueco

TÉCNICAS ACTUALES DE CONGELACIÓN DE EMBRIONES IN VITRO

Congelación tradicional (métodos de equilibrio)

Los crioprotectores (CP) utilizados en estos métodos son normalmente permeables. Los más frecuentemente utilizados son: glicerol y etilenglicol.

Durante la fase inicial de preenfriamiento, los embriones se exponen a la presencia del crioprotector en una fase que denominamos de equilibración. La respuesta inmediata del embrión ante la presencia de un CP permeable es una rápida disminución de volumen por pérdida del agua intracelular, hasta que se alcanza el equilibrio. Este fenómeno se debe a la hiperosmolaridad inicial de la solucion extracelular y a que los embriones son mucho más permeables al agua que a los crioprotectores; la contracción se detiene cuando se alcanza el equilibrio entre la salida de agua y la entrada del CP. A medida que el CP penetra en el embrión, éste se expande gradualmente a causa de una re-entrada de agua para el mantenimiento del equilibrio osmótico. El momento en que se produce esta re-expansión refleja:

• La especie del embrión.
  
  
• El estadio de desarrollo embrionario.
  
  
• El ratio superficie/volumen del embrión.
  
  
• El crioprotector utilizado.
  
  
• La temperatura de exposición.
  
  
  
  
  
  

  

  Ricardo Fernández Barrueco

  
  
  
  
  Continuara...